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mem培養基是什么?聽聽專家怎么說

作者:樂診生物技術發布時間:2021-06-15 11:30瀏覽量:

MEM培養基的介紹

  MEM培養基(minimum essential medium)是動物細胞培養中的常用的培養基,主要是貼壁細胞的培養,修改配方后也可用于其他類型細胞培養,例如如無鈣(Ca)MEM培養基可被用于懸浮細胞的培養,而Hank’s平衡鹽的MEM培養基可被用于二倍體細胞的培養。

MEM和DMEM的區別是什么?

  DMEM細胞培養基是在MEM培養基的基礎上研制的。與MEM比較增加了各種成分用量,同時又分為高糖型(低于4500g/L)和低糖型(低于1000g/L)。而MEM中葡萄糖含量1000mg/L。DMEM高糖型有利于細胞停泊于一個位置生長,適于生長較快、附著較困難腫瘤細胞等。 原文鏈接:http://ggene.cn/html/protocol/CELL/culture/2009/0911/3036.html。

  一、mem簡介:

  MEM是2-甲氧基乙氧基甲基氯的英文簡寫,是合成羅紅霉素的中間體,也是有機化學中極重要的羥基保護基之一。

  二、主要用途:

  1、用作羅紅霉素的中間體。

  2、1-氯甲氧基-2-甲氧基乙烷 (MEMCl) 被定義為有機合成中的重要保護基。它可以在溫和的條件下與羥基、氨基和羧酸反應生成相應的醚、取代胺和酯,生成的產物也可以在多種條件下脫去保護基。

  三、dmem簡介:

  DMEM是一種含各種氨基酸和葡萄糖的培養基,是在MEM培養的基礎上研制的。與MEM比較增加了各種成分用量,同時又分為高糖型(低于4500mg/L)和低糖型(低于1000mg/L)。高糖型有利于細胞停泊于一個位置生長,適于生長較快、附著較困難腫瘤細胞等。該類培養基廣泛應用于疫苗生產和各種初代病毒宿主細胞的細胞培養及單一細胞培養。

  四、應用:

  該類培養基廣泛應用于疫苗生產和各種初代病毒宿主細胞的細胞培養及單一細胞培養;如A9、3T6、BALB/3T3、COS-1、COS-3、COS-7、L6、WEHI-3b等細胞系的培養。

MEM培養基的配方

  1配置前準備:配置培養基新制備的milli water。調節pH值的酸堿溶液也應該使用這種水配置。制備培養基的器皿清洗干凈,并用milli water潤洗兩次。

  2.溶解培養基:取5%終體積的milli water,加入到1L玻璃杯中,將干粉培養基倒入燒杯,水洗包裝袋內面兩次,倒入培養液中。磁力攪拌助溶。

  3.補加試劑:根據包裝袋說明加入NaHCO3(2.2g),HEPES(2.383,10mmol)、非必需氨基酸(可不加,10ml)。

  4.加抗生素:一般抗生素終濃度——青霉素100U/ml,鏈霉素100U/ml。1L加入10m儲備液。

  5.調pH值:加水到1000ml,然后用HCL或者NaOH調節pH到7.2。

  6.過濾除菌:采用0.22um濾膜。過濾后分裝于小瓶中(100或200ml)。過濾后pH值一般上升0.1-0.3。

  7.加小牛血清:根據培養基配置的量將小牛血清分裝,冷凍保存(-20度)。臨用前將加入小牛血清10%。

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