PBS緩沖液的配制
配制方法:
稱取磷酸二氫鉀(KH2PO4),磷酸氫二鈉(Na2HPO4·12H2O),氯化鈉(NaCl),氯化鉀(KCl),吐溫-20 ,加水。
PBS:Phosphate Buffered Saline
PBS 1L配方pH7.4:磷酸二氫鉀(KH2PO4):0.27g,
磷酸氫二鈉(Na2HPO4):1.42g,
氯化鈉(NaCl):8g,
氯化鉀(KCl)0.2g,
加去離子水約800mL充分攪拌溶解,然后加入濃鹽酸調pH至7.4,最后定容到1L。
不同pH的PBS緩沖溶液配制方法
利用公式:PH=PKa2-lg[H2PO4-]/[HPO42-],計算出磷酸二氫鹽與磷酸氫鹽的濃度比,進而計算出一定體積溶液中,磷酸二氫鹽和磷酸氫鹽的質量。與水配制成溶液即可。
如何選擇的PBS緩沖溶液pH值?
緩沖溶液的有效PH值應該在pk±1之間。
如果以磷酸/磷酸二氫鹽為共軛酸堿對,PKa1=2.12,緩沖溶液的PH在1.12-3.12之間;
如果以磷酸二氫鹽/磷酸氫鹽為共軛酸堿對,PKa2=7.21緩沖溶液的PH在6.21-8.21之間;
如果以磷酸氫鹽/磷酸鹽為共軛酸堿對,PKa3=12.67.緩沖溶液的PH在11.67-13.67之間.