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tae緩沖液可以用多久?聽聽專家怎么說

作者:樂診生物技術發布時間:2021-06-10 15:34瀏覽量:

TAE緩沖液能保存多久?

  幾個月沒問題。

  電泳槽里就不行了,沒幾天水分會揮發的,而且使用次數多了緩沖能力也會下降,隔幾天就換或者往里再添加點新鮮的吧。

TAE電泳緩沖液有沒有毒?

  TAE電泳緩沖液本身沒有毒。

  TAE緩沖液是由三羥甲基氨基甲烷(Tris base)、乙酸(acetic acid)和乙二胺四乙酸(EDTA)組成的緩沖液,英文名為三種組成成分的首字母。在分子生物學實驗中常被用作DNA或RNA進行凝膠電泳時的緩沖液。緩沖液在電泳過程中的一個作用是維持合適的pH。

TAE緩沖液的概述

  TAE是由三羥甲基氨基甲烷(Tris base)、乙酸(acetic acid)和乙二胺四乙酸(EDTA)組成的緩沖液,英文名為三種組成成分的首字母。在分子生物學實驗中常被用作DNA或RNA進行凝膠電泳時的緩沖液 。

  緩沖液在電泳過程中的一個作用是維持合適的pH。電泳時正極與負極都會發生電解反應,正極發生的是氧化反應(4OH--4e->2H2O+O2),負極發生的是還原反應(4H++4e->2H2),長時間的電泳將使正極變酸,負極變堿。一個好的緩沖系統應有較強的緩沖能力,使溶液兩極的pH保持基本不變。

  電泳緩沖液的另一個作用是使溶液具有一定的導電性,以利于DNA分子的遷移,例如,一般電泳緩沖液中應含有0.01-0.04mol/L的Na+離子,Na+離子的濃度太低時電泳速度變慢;太高時就會造成過大的電流使膠發熱甚至熔化。

  電泳緩沖液還有一個組分是EDTA,加入濃度為1-2mmol/L,目的是螯合Mg2+ 等離子,防止電泳時激活 DNA酶,此外還可防止Mg2+離子與核酸生成沉淀。

  TAE是使用最廣泛的緩沖系統。其特點是超螺旋在其中電泳時更符合實際相對分子質量(TBE中電泳時測出的相對分子質量會大于實際分子質量),且雙鏈線狀DNA在其中的遷移率較其他兩種緩沖液快約10%,電泳大于13kb的片段時用TAE緩沖液將取得更好的分離效果,此外,回收DNA片段時也易用TAE緩沖系統進行電泳。TAE的缺點是緩沖容量小,長時間電泳(如過夜)不可選用,除非有循環裝置使兩極的緩沖液得到交換。

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