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實驗 馬丁氏培養基的制備

作者:樂診生物技術發布時間:2020-07-20 18:26瀏覽量:
  一、目的要求
 
  通過對分離真菌用的馬丁氏(Martin)培養基配制,掌握對選擇培養基的配制方法,并明確選擇的原理。
 
  二、基本原理
 
  馬丁氏培養基是一種用來分離真菌的選擇性培養基。此培養基是由葡萄糖、蛋白胨、KH2PO4、MgSO4•7H2O、孟加拉紅(玫瑰紅,Rose Bengal)和鏈霉素等組成。其中葡萄糖主要作為碳源,蛋白胨主要作為氮源,KH2PO4和MgSO4•7H2O作為無機鹽,為微生物提供鉀、磷和鎂離子。而孟加拉紅和鏈霉素主要是細菌和放線菌的抑制劑,對真菌無抑制作用,因而真菌在這種培養基上可以得到優勢生長,從而達到分離真菌的目的。
 
  馬丁氏培養基配方如下:
 
  KH2PO4 1g
 
  MgSO4•7H2O 0.5g
 
  蛋白胨5g
 
  葡萄糖10g
 
  瓊脂15—20g
 
  水1000ml
 
  pH自然
 
  此培養液1000ml加1%孟加拉紅水溶液3.3ml。臨用時每100ml培養基中加1%鏈霉素液0.3ml。
 
  三、器材
 
  KH2PO4,MgSO4•7H2O,蛋白胨,葡萄糖,瓊脂,孟加拉紅,鏈霉素;
 
  試管,三角燒瓶,量筒,玻棒,培養基分裝器,扭力天平,牛角匙,高壓蒸汽滅菌鍋等。
 
  四、操作步驟
 
  1.稱量和溶化
 
  按培養基配方,準確稱取各成分,并將各成分依次溶化在少于所需要的水量中。待各成分完全溶化后,補足水分到所需體積。再將孟加拉紅配成1%的溶液,在1000ml培養液中加入1%的孟加拉紅溶液3.3ml,混勻后,加入瓊脂加熱溶化(方法同實驗十九)。
 
  2.分裝、加塞、包扎、滅菌,無菌檢查與實驗十九相同。
 
  3.鏈霉素的加入
 
  由于鏈霉素受熱容易分解,所以臨用時,將培養基溶化后待溫度降至45℃左右時才能加入??上葘㈡溍顾嘏涑?%的溶液,在100ml培養基中加1%鏈霉素液0.3ml,使每毫升培養基中含鏈霉素30μg。
 
  五、實驗報告
 
  思考題
 
 ?。?)什么是選擇培養基?它在微生物學工作中有何重要性?
 
 ?。?)培養細菌、放線菌、酵母菌、霉菌的最適pH值各為多少?
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